|
Огромное разнообразие
биологически активных веществ продуцируют как наземные так и морские организмы.
Многие из них являются ценным сырьем для производства пищевых продуктов
и лекарственных средств. Химики-биоорганики владеют значительным арсеналом
средств и методов для поиска, выделения, установления структуры и функции
этих веществ. Развитие молекулярной биологии, биохимии, нейрофизиологии
и ряда смежных наук обязано своими успехами применению в качестве инструментов
исследования обширной группы биологически активныз веществ. Центральное
место в ней принадлежит зоотоксинам белковой природы. Как верно заметил
Клод Бернар: “Яд может быть использован для убийства и для лечения больных,
для физиолога яд становится инструментом, позволяющим проанализировать
наиболее интимные явления в живых структурах”. И действительно, выделенные
из некоторых насекомых, рептилий, морских беспозвоночных высокомолекулярные
нейро- и цитотоксины являются неоценимым инструментом в руках исследователей
при установлении молекулярной организации и механизмов функционирования
биологических мембран, в изучении процессов транспорта ионов и метаболитов
через клеточные мембраны, липид-белковых и белок-белковых взаимодействий
в мембране.
Наши исследования направлены
на поиск перспективных источников высокоспецифичных цитолитических токсинов
в морских беспозвоночных, относящихся к классу Coelenterata, отряду Actinaria,
на изучение структуры и механизма действия этих соединений.
Актинии
- морские животные, своей формой и окраской напоминающие великолепные причудливые
цветы. Характерной особенностью этих кишечнополостных является наличие
стрекательных клеток, нематоцистов, вырабатывающих ядовитый секрет и служащий
для умерщвления добычи и защиты от врагов. Они опасны и для человека, поэтому
добыча и работа с ними требует большой осторожности.
Наиболее
богаты разнообразными видами морских актиний тропические районы мирового
океана. К настоящему времени из них выделено и охарактеризовано несколько
десятков цитотоксических полипептидов из более чем двадцати видов актиний.
Для многих из них установлена полная или частичная химическая структура.
Все они относятся к группе мембраноактивных полипептидов. Механизм действия
их может быть описан трехступенчатым процессом:
свободный
токсин <- - > связанный токсин<- -> дефект мембраны ->лизис клетки.
Проникновение
цитотоксинов в липидный бислой происходит благодаря специфическому связыванию
со сфингомиелином, выступающим в роли мембранного акцептора, и заканчивается
формированием в нем пор (или ионных каналов), что в итоге приводит к лизису
клеток. Экзогенный сфингомиелин ингибирует мембранолитическое действие
цитолизинов актиний, и поэтому все они образуют группу сфингомиелин-ингибируемых
цитолизинов.
Более скромное
внимание исследователей уделено уникальному виду морской актинии Metridium
senile, обитающей в холодных водах Японского моря и обильно представленной
в акватории залива Посьет. Поразительным фактом является то, что эта актиния
продуцирует высокомолекулярный метридиолизин, близкий по физико-химическим
свойствам ряду известных бактериальных тиол-активируемых цитотоксинов,
продуцируемых грамположительными бактериями рода Bacillus, Clostridium,
Listeria, Streptococcus. Подобно стрептолизину О, пневмолизину, цереолизину,
ботулинолизину, перфринголизину и др. метридиолизин ингибируется экзогенным
холестерином, который, играя важную роль в регуляции стабильности и проницаемости
клеток, является мембранным акцептором как тиол-активируемых бактериальных
токсинов так и метридиолизина.
Нами изучены
физико-химические характеристики этого токсина, которые значительно отличаются
от характеристик цитолизинов, ингибируемых сфингомиелином. С помощью ряда
биофизических и биохимических методов мы исследовали специфичность связывания
метридиолизина с липидным матриксом, исследовали механизм его действия
на биологические и модельные мембраны. Мы установили что метридиолизин
уже в незначительных концентрациях действует не только как порообразующее,
но и как детергентоподобное соединение. Ряд общих закономерностей в действии
обеих групп цитотоксинов позволяет предположить, что метридиолизин, имеющий
значительно более низкую токсичность, чем сфингомиелин-ингибируемые и бактериальные
цитолизины, может также с успехом использоваться в различных областях знаний
в качестве инструмента исследования.
Необходимо
отметить, что из всех известных к настоящему времени актиний единственный
вид Metridium senile продуцирует не обнаруженный до сих пор ни в одном
другом аномальный высокомолекулярный цитолизин с уникальными свойствами
и действием, и можно предположить, что этот вид, будучи малоизученным,
таит новые находки для пытливых и настойчивых исследователей.
Некоторые работы по данной теме:
- 1. Монастырная М.М., Козловская Э.П., Иванов А.С., Мольнар А.А., Халилов Э.М., Еляков Г.Б. Действие метридиолизина из морской актинии Metridium senile на биологические и модельные мембраны // Биол. мембраны. 1988. Т. 5. С. 830-835.
- 2. Брежестовский П.Д., Монастырная М.М., Козловская Э.П., Еляков Г.Б., Действие гемолизина из морской актинии Radianthus macrodactylus на мембрану эритроцитов // Докл. АН СССР. 1988. Т. 299. C. 748-751.
- 3. Shnyrov V.L., Monastyrnaya M.M., Zhadan G.G., Kuznetsova S.M., Kozlovskaya E.P. Calorimetric study of interaction of toxin from Radianthus macrodactylus with erythrocyte membrane // Biochem. Intl.. 1992. V. 26. P. 219-229.