1. Название проекта

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ-32P- РАДИОАКТИВНО МЕЧЕНЫХ НУКЛЕОТИДОВ

2. Описание проекта

       Тимидинкиназа - фермент, катализирующий перенос неорганического фосфата с ATФ на тимидин и ряд других пиримидиновых нуклеозидов. Тимидинкиназа была частично очищена из одного из штаммов морских микроорганизмов. Степень очистки составила 500 раз, удельная активность препарата - 1 нмоль/мг белка.
       Для проведения реакции фосфорилирования тимидина до тимидинмонофосфата требуются следующие компоненты: буфер, ATФ, тимидин и ионы Mg2+. Реакция протекает с высокой скоростью при температуре от 30 до 400С.
       Используя в качестве донора фосфата, выпускаемый промышленностью 32P-ATФ, можно в одну стадию получать меченый тимидинмонофосфат с высокой удельной радиоактивностью.

3. Область применения и конкурентоспособность

       Метод может быть использован как в крупномасштабном производстве -32(33)P-пиримидиновых нуклеозидов, так и в лабораторных условиях. Возможно создание набора ферментов для получения -32(33)P-нуклеозид-моно-, -ди- и -трифосфатов в рамках небольшой радиоизотопной лаборатории и т.д.

4.  Степень готовности проекта для практической реализации

       Разработаны методы выделения ферментов и определены условия проведения реакции фосфорилирования.

5.  Технико-экономическое обоснование целесообразности реализации проекта

       Предлагаемая нами методика основанная на реакции фосфорилирования, катализируемой тимидинкиназой, осуществляется в одном растворе, с высокой скоростью, выходом более 50%, компоненты изолированы от окружающей среды. Основные финансовые затраты связаны с выращиванием биомассы микроорганизмов, выделением соответствующих ферментов и приобретением исходных компонентов для проведения реакции.
       Метод дает возможность быстро и с высоким выходом получать такие дорогостоящие биохимические реактивы, как радиоактивно меченые -32P нуклеозидмоно-, -ди- и -трифосфаты, а также и различные синтетические аналоги этих соединений.

6.  Способ передачи технологии, сферы сотрудничества

       Продажа права на использование технологии. Совместная производственная деятельность при условии ее инвестирования.

7. Авторы проекта, адрес института, тел., факс, эл. почта

Л.Л. Терентьев, Н.А. Терентьева, В.В. Михайлов, В.А. Рассказов
Тихоокеанский институт биоорганической химии ДВО РАН
690022, г. Владивосток, проспект 100-летия Владивостока, 159,
тел. (4232) 311430, факс (4232) 314050, эл. почта: elyakov@stl.ru